मछली झींगा शहद संवेदनशीलता के लिए नाइट्रोफुरन एओजेड किट टेस्ट एलिसा 0.01 पीपीबी 96 कुएं / किट

मछली झींगा शहद संवेदनशीलता के लिए नाइट्रोफुरन एओजेड एलिसा टेस्ट किट 0.01 पीपीबी 96 कुएं / किट

 

1. सिद्धांत

लानत होनाओओडी सुरक्षा रैपिड टेस्ट किटनमूने में AOZ का पता लगाने के लिए प्रतिस्पर्धी एंजाइम इम्युनोसे पर आधारित है।युग्मन प्रतिजन माइक्रो-वेल धारियों पर पूर्व-लेपित होते हैं।नमूने में AOZ और माइक्रो-वेल धारियों पर पूर्व-लेपित युग्मन एंटीजन, AOZ-विरोधी एंटीबॉडी के लिए प्रतिस्पर्धा करते हैं।एंजाइम संयुग्म को जोड़ने के बाद, रंग के लिए टीएमबी सब्सट्रेट जोड़ा जाता है।नमूने के ऑप्टिकल घनत्व (OD) मान में AOZ के साथ एक नकारात्मक सहसंबंध है।इस मान की तुलना मानक वक्र से की जाती है और AOZ सांद्रता बाद में प्राप्त की जाती है।

2. अवयव

1	माइक्रो-वेल स्ट्रिप्स	8 हटाने योग्य के साथ 12 स्ट्रिप्स प्रत्येक कुएं
2	6 × मानक समाधान (प्रत्येक 1 एमएल)	0पीपीबी	0.01पीपीबी
		0.03पीपीबी	0.09पीपीबी
		0.27पीपीबी	0.81पीपीबी
3	एंजाइम संयुग्म	7 मिलीग्राम	लाल टोपी
4	एंटीबॉडी काम कर समाधान	7 मिलीग्राम	नीली टोपी
5	सब्सट्रेट ए	7 मिलीग्राम	सफेद टोपी
6	सब्सट्रेट बी	7 मिलीग्राम	काली टोपी
7	समाधान रोकें	7 मिलीग्राम	पीली टोपी
8	20 × केंद्रित धुलाई बफर	40 मिलीलीटर	सफेद टोपी
9	2× सांद्रित पुनर्विघटन विलयन	50 मिलीलीटर	पारदर्शी टोपी
10	2-नाइट्रोबेंजाल्डिहाइड (C7H5NO3)	10 मिली	काली टोपी

 

3. तकनीकी विनिर्देश

संवेदनशीलता: 0.01ppb

ऊष्मायन तापमान: 25 ℃

ऊष्मायन समय: 30min～15min

पहचान सीमा

ऊतक, अंडा, शहद: 0.05ppb

क्रॉस-रिएक्शन दर

एओजेड 100%

एएमओजेड <0.1%

एएचडी <0.1%

एसईएम <0.1%

वसूली दर

ऊतक, अंडा 95±25%

शहद 85±23%

 

4. आवश्यक सामग्री लेकिन प्रदान नहीं की गई

1) उपकरण: माइक्रोप्लेट रीडर, प्रिंटर, होमोजेनाइज़र, नाइट्रोजन-सुखाने वाला उपकरण, भंवर, सेंट्रीफ्यूज, मापने वाले पिपेट, संतुलन (0.01 ग्राम की पारस्परिक संवेदनशीलता), इनक्यूबेटर, पानी का स्नान;

2) माइक्रोपिपेटर्स: सिंगल-चैनल 20-200 µ l, 100-1000 µ l, और मल्टी-चैनल 30-300 µ l;

3) अभिकर्मक: NaOH, एथिल एसीटेट, n-हेक्सेन, HCI (लगभग 36.5%), K2HPO4·3H2O

 

5. नमूना पूर्व उपचार

निर्देश

किसी भी प्रकार के नमूने के पूर्व-उपचार से पहले निम्नलिखित बिंदुओं पर विचार किया जाना चाहिए:

1) प्रयोगों के लिए केवल डिस्पोजेबल युक्तियों का उपयोग किया जा सकता है और विभिन्न अभिकर्मकों को अवशोषित करने के लिए उपयोग किए जाने पर युक्तियों को बदला जाना चाहिए;

2) प्रयोग से पहले, प्रत्येक प्रयोगात्मक उपकरण साफ होना चाहिए और यदि आवश्यक हो तो फिर से साफ किया जाना चाहिए, ताकि प्रायोगिक परिणामों में हस्तक्षेप करने वाले संदूषण से बचा जा सके।

नमूना पूर्व उपचार से पहले समाधान तैयार करना:

1) 0.1 M K2HPO4: 11.4 g K2HPO4·3H2O को विआयनीकृत पानी में 500mL तक घोलें।

2) 1 एम एचसीएल: 8.6एमएल एचसीआई (लगभग 36.5%) को विआयनीकृत पानी में 100 एमएल तक घोलें।

3) 1 M NaOH: 4g NaOH को विआयनीकृत पानी में 100mL तक घोलें।

4) 2×सांद्रित पुनर्विघटन विलयन 1:1 (1mL सांद्र पुनर्विघटन विलयन + 1mL विआयनीकृत पानी) पर विआयनीकृत पानी से पतला होता है, जिसका उपयोग नमूना पुनर्विघटन के लिए किया जाता है।

 

5.1 नमूने तैयार करना

एक)ऊतक, अंडा

1) समरूप नमूने का 1 ± 0.05 ग्राम वजन करें, प्रत्येक ट्यूब में 4 एमएल आसुत जल, 0.5एमएल 1 एम एचसीआई और 100µ एल 2-नाइट्रोबेंजाल्डिहाइड (सी7एच5एनओ3) मिलाएं, 2 मिनट के लिए ठीक से हिलाएं।

2) रात में 37 ℃ (लगभग 16 घंटे) पर सेते हैं या पानी के स्नान (2 घंटे) द्वारा 56 ℃ पर सेते हैं।

3) प्रत्येक ट्यूब में 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH और 6mL एथिल एसीटेट मिलाएं, 30 सेकंड के लिए हिलाएं।

4) 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) पर 4000r / मिनट से ऊपर सेंट्रीफ्यूज (यदि इमल्सीफिकेशन या एथिल एसीटेट परत 3 मिली के लिए पर्याप्त नहीं है, तो 10 मिनट के लिए 80 ℃ पानी के स्नान में इनक्यूबेट नमूना और बार-बार अपकेंद्रित्र; या गति बढ़ाएं और अपकेंद्रित्र का समय बढ़ाएं)।

5) एथिल एसीटेट परत के 3mL को एक नई केन्द्रापसारक ट्यूब में स्थानांतरित करें और 50 ℃ पर नाइट्रोजन या हवा से सूखने के लिए वाष्पित करें।

6) 2एमएल एन-हेक्सेन में सूखे अवशेषों को भंग करें, पतला पुनर्विघटन समाधान के 1 एमएल जोड़ें, 30 सेकंड के लिए ठीक से मिलाएं, 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) पर 4000 आर/मिनट से ऊपर सेंट्रीफ्यूज;अप-लेयर एन-हेक्सेन चरण निकालें (यदि पायसीकरण है, तो अप-लेयर एन-हेक्सेन चरण को हटाने के बाद, 10-20min के लिए 70 ℃ पानी के स्नान में इनक्यूबेट नमूना, बार-बार अपकेंद्रित्र)।

7) विश्लेषण के लिए निचले के 50 µ l को लें ।

नमूने के कमजोर पड़ने की तह: 2

 

बी) शहद

1) समरूप नमूने (शहद) का 2 ± 0.05 ग्राम वजन करें, प्रत्येक ट्यूब में 4एमएल आसुत जल, 0.5एमएल 1 एम एचसीआई और 100 µ एल 2-नाइट्रोबेंजाल्डिहाइड (सी7एच5एनओ3) मिलाएं, 2 मिनट के लिए ठीक से हिलाएं;

2) रात में 37 ℃ (लगभग 16 घंटे) पर सेते हैं या पानी के स्नान (2 घंटे) द्वारा 56 ℃ पर सेते हैं।

3) प्रत्येक ट्यूब में 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH और 6mL एथिल एसीटेट मिलाएं, 30 सेकंड के लिए हिलाएं।

4) 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) पर 4000r / मिनट से ऊपर अपकेंद्रित्र (यदि इमल्सीफिकेशन या एथिल एसीटेट परत 3 मिलीलीटर के लिए पर्याप्त नहीं है, तो 80 ℃ पानी के स्नान में 10 मिनट के लिए इनक्यूबेट नमूना और बार-बार अपकेंद्रित्र; या गति बढ़ाएं और अपकेंद्रित्र का समय बढ़ाएं)।

5) एथिल एसीटेट परत के 3mL को एक नई केन्द्रापसारक ट्यूब में स्थानांतरित करें और 50 ℃ पर नाइट्रोजन या हवा द्वारा सूखापन के लिए वाष्पित करें।

6) सूखे अवशेषों को 2mL N-hexane में घोलें, पतला पुनर्विघटन घोल का 1mL डालें, 30 सेकंड के लिए ठीक से मिलाएं, 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) पर 4000r / मिनट से ऊपर सेंट्रीफ्यूज करें;अप-लेयर एन-हेक्सेन चरण निकालें (यदि पायसीकरण है, तो अप-लेयर एन-हेक्सेन चरण को हटाने के बाद, 10-20min के लिए 70 ℃ पानी के स्नान में इनक्यूबेट नमूना, बार-बार अपकेंद्रित्र)।

7) विश्लेषण के लिए निचले के 50 µ l को लें ।

नमूने के कमजोर पड़ने की तह: 1

 

6. एलिसा प्रक्रियाएं

6.1 निर्देश

1) उपयोग करने से पहले सभी अभिकर्मकों और माइक्रो-वेल स्ट्रिप्स को कमरे के तापमान (20-25 ℃) में लाएं;

2) उपयोग के तुरंत बाद सभी अभिकर्मकों को 2-8 ℃ पर लौटा दें;

3) एलिसा विश्लेषण की पुनरुत्पादकता, काफी हद तक, प्लेट धोने की स्थिरता पर निर्भर करती है।एलिसा प्रक्रियाओं में प्लेट धोने का सही संचालन महत्वपूर्ण बिंदु है;

4) निरंतर तापमान पर ऊष्मायन के लिए, सभी नमूनों और अभिकर्मकों को प्रकाश के संपर्क से बचना चाहिए, और प्रत्येक माइक्रोप्लेट को कवर झिल्ली द्वारा सील किया जाना चाहिए।

 

6.2 संचालन प्रक्रियाएं

1)कम से कम 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) के लिए परीक्षण किट लाओ, ध्यान दें कि प्रत्येक अभिकर्मक को उपयोग करने से पहले समान रूप से मिश्रण करने के लिए हिलाया जाना चाहिए, प्लेट फ्रेम में आवश्यक माइक्रो-वेल स्ट्रिप्स डालें।अप्रयुक्त माइक्रोप्लेट को फिर से सील करें, 2-8 ℃ पर स्टोर करें, जमे हुए नहीं।

2)समाधान की तैयारी: 1:19 (1 भाग 20 × केंद्रित वाशिंग बफर + 19 भाग विआयनीकृत पानी) पर विआयनीकृत पानी के साथ 20 × केंद्रित धुलाई बफर के 40mL को पतला करें।या आवश्यकतानुसार तैयार करें।.

3)नंबरिंग: नमूनों और मानक समाधान के अनुसार सूक्ष्म कुओं की संख्या;प्रत्येक नमूना और मानक समाधान दो प्रतियों में किया जाना चाहिए, उनकी स्थिति रिकॉर्ड करें।

4)अलग डुप्लिकेट कुओं में नमूना या मानक समाधान के 50 µ एल जोड़ें;प्रत्येक कुएं में 50 उल एंजाइम संयुग्मित फिर 50 µ एल एंटीबॉडी काम कर समाधान जोड़ें, प्लेट को मैन्युअल रूप से हिलाकर धीरे से मिलाएं ।कवर झिल्ली के साथ माइक्रोप्लेट को सील करें, और 25 ℃ for30min पर इनक्यूबेट करें।

5)माइक्रोवेल से तरल बाहर डालें, शोषक कागज पर सूखने के लिए फ्लैप करें, 15-30 एस के लिए माइक्रोप्लेट को धोने के लिए 250 µ एल/वॉशिंग बफर जोड़ें, फिर बाहर निकालें और शोषक कागज के साथ सूखने के लिए फ्लैप करें, 4-5 बार दोहराएं।(यदि फड़फड़ाने के बाद बुलबुले हैं, तो उन्हें साफ युक्तियों से काट लें)।

6)रंगाई: सब्सट्रेट A के 50 µ l को जोड़ें और फिर सब्सट्रेट B के 50 µ l को प्रत्येक कुएं में जोड़ें ।प्लेट को मैन्युअल रूप से हिलाकर धीरे से मिलाएं, फिर रंग के लिए अंधेरे में 25 ℃ for15min पर इनक्यूबेट करें।

7)निर्धारण: प्रत्येक कुएं में स्टॉप सॉल्यूशन के 50 µ l को जोड़ें ।प्लेट को हाथ से हिलाकर धीरे से मिलाएं।प्रत्येक कुएं के आयुध डिपो मान को निर्धारित करने के लिए माइक्रोप्लेट रीडर की तरंगदैर्घ्य को 450nm पर सेट करें।(5 मिनट के भीतर दोहरे तरंग दैर्ध्य 450/630nm पर OD मान पढ़ने की अनुशंसा करें)।

 

7. परिणाम निर्णय

परिणामों को आंकने की दो विधियाँ हैं: पहला एक मोटा निर्णय है, जबकि दूसरा मात्रात्मक निर्धारण है।ध्यान दें कि नमूने के OD मान का AOZ एकाग्रता के साथ नकारात्मक संबंध है।

7.1 गुणात्मक निर्धारण

AOZ की सांद्रता रेंज (ng/mL) नमूने के औसत OD मान की मानक समाधान के साथ तुलना करके प्राप्त की जा सकती है।यह मानते हुए कि नमूने का OD मान 0.3 है, और नमूने का 1.0 है, मानक समाधान का OD मान है: 0ppb के लिए 2.243, 0.01ppb के लिए 1.816, 0.03ppb के लिए 1.415, 0.09ppb के लिए 0.74, 0.27ppb के लिए 0.313 , 0.155 0.81पीपीबी के लिए, तदनुसार नमूने की एकाग्रता सीमा 0.27पीपीबी से 0.81पीपीबी है, और नमूना की 0.03पीपीबी से 0.09पीपीबी है।

7.2 मात्रात्मक निर्धारण

अवशोषण मानों का माध्य मान नमूने के औसत OD मान (B) के लिए प्राप्त किया जाता है और मानक समाधान को पहले मानक समाधान (0 मानक) के OD मान (B0) से विभाजित किया जाता है और बाद में 100% से गुणा किया जाता है, अर्थात ,

 

अवशोषण मूल्य का प्रतिशत =	बी	×100%
	बी0

 

B—नमूने का औसत OD मान या मानक समाधान

B0—0 एनजी/एमएल मानक समाधान का औसत ओडी मान

मानक समाधान के अवशोषण प्रतिशत के साथ मानक वक्र बनाएं और AOZ मानक समाधान (ng/mL) के सेमीलॉगरिथम मानों को क्रमशः Y- और X-अक्ष के रूप में बनाएं।मानक वक्र में इसके अवशोषण प्रतिशत को शामिल करके नमूने की संगत सांद्रता को मानक वक्र से पढ़ें।परिणामी मूल्य को बाद में संबंधित कमजोर पड़ने वाले गुना से गुणा किया जाता है, अंत में नमूने में AOZ एकाग्रता प्राप्त करता है।

 

8. सावधानियां

1)25 ℃ से नीचे के कमरे का तापमान या अभिकर्मकों का तापमान और नमूनों को कमरे के तापमान (20-25 ℃) में नहीं लौटाया जा रहा है, जिससे मानक OD मान कम हो जाएगा।

2)धुलाई प्रक्रिया में माइक्रोप्लेट का सूखापन गैर-रैखिक मानक वक्रों और अवांछनीय पुनरुत्पादकता सहित स्थितियों के साथ होगा;तो धोने के तुरंत बाद अगले चरण पर जाएं।

3)समान रूप से मिलाएं, अन्यथा अवांछनीय प्रजनन क्षमता होगी।

4)स्टॉप समाधान 2 एम सल्फ्यूरिक एसिड समाधान है, त्वचा से संपर्क करने से बचें।

5)किट की समाप्ति तिथि से अधिक का उपयोग न करें।किट से मिलावटी या मिलावटी अभिकर्मकों के उपयोग से संवेदनशीलता और पता लगाने वाले OD मानों में परिवर्तन होगा।उपयोग करने के लिए विभिन्न लॉट के किट से अभिकर्मकों का आदान-प्रदान न करें।

6)अप्रयुक्त माइक्रोप्लेट को फिर से सील करने के लिए ऑटो-सीलिंग बैग में डालें।मानक समाधान और रंगहीन रंग पूर्व प्रकाश संवेदनशील है, और इस प्रकार वे सीधे प्रकाश के संपर्क में नहीं आ सकते हैं।

7)किसी भी रंग के साथ रंग समाधान को त्यागें जो इस समाधान के अध: पतन को इंगित करता है।0.5 से कम के मानक समाधान 1(0 पीपीबी) का पता लगाने का मूल्य इसके अध: पतन को इंगित करता है।

8)इष्टतम प्रतिक्रिया तापमान 25 ℃ है, और बहुत अधिक या बहुत कम तापमान के परिणामस्वरूप संवेदनशीलता और OD मानों का पता लगाने में परिवर्तन होगा।

 

9. भंडारण और समाप्ति तिथि

भंडारण: 2-8 ℃ पर स्टोर करें, जमे हुए नहीं।

समाप्ति तिथि: 12 महीने;उत्पादन की तारीख बॉक्स पर है।

नोट: यदि माइक्रोप्लेट के वैक्यूम पैकेज में रिसाव है, तो यह अभी भी उपयोग करने के लिए मान्य है, परीक्षण के परिणाम को प्रभावित न करें, उपयोग करने के लिए आराम करें।

 

 

Q1: आपको शिप करने में कितना समय लगेगा?
A1: आमतौर पर 7 कार्य दिवसों के भीतर जहाज।

 

प्रश्न 2: क्या आप OEM / ODM का समर्थन करते हैं?
A2: समर्थित किया जा सकता है।हम आपकी विशिष्ट आवश्यकताओं और विशिष्ट मात्रा के अनुसार अनुकूलित कर सकते हैं।

 

प्रश्न 3: गुणवत्ता नियंत्रण के मामले में आपका कारखाना कैसा चल रहा है?
ए 3: हमारे पास आईएसओ 9 001 प्रमाणीकरण और आईएसओ13485 प्रमाणीकरण है, अब तक सभी उत्पादन प्रक्रिया, हमारे पास मानक नियम हैं, हम सरकार के प्रासंगिक व्यवहार और कानूनों का पालन करते हैं।

 

Q4: बिक्री के बाद सेवा की गारंटी है?
ए 4: हम पेशेवर ऑनलाइन तकनीकी बिक्री के बाद सेवा प्रदान करते हैं।यदि प्रयोग के दौरान उत्पाद विफल हो जाता है, तो हम प्रदान कर सकते हैं
टेलीफोन, वीडियो और अन्य रूपों के माध्यम से एक-से-एक मार्गदर्शन।

 

Q5: आपकी न्यूनतम आदेश मात्रा क्या है?
ए 5: 1 किट।

 

Q6: शिपिंग विधि क्या है?
ए 6: इसे एक्सप्रेस (फेडेक्स, यूपीएस, डीएचएल, ईएमएस, आदि) या हवा और जमीन द्वारा भेज दिया जा सकता है। कृपया ऑर्डर देने से पहले हमारे साथ पुष्टि करें।