दूध की संवेदनशीलता के लिए नाइट्रोफुरन एसईएम एलिसा खाद्य सुरक्षा परीक्षण किट 0.02 पीपीबी 96 कुएं/किट

दूध संवेदनशीलता के लिए नाइट्रोफुरन एसईएम एलिसा खाद्य सुरक्षा परीक्षण किट 0.02 पीपीबी 96 कुएं/किट

 

1. नाइट्रोफुरन एसईएम एलिसा खाद्य सुरक्षा परीक्षण किट सिद्धांत:

 

यह परीक्षण किट नमूने में नाइट्रोफुरन (एसईएम) का पता लगाने के लिए प्रतिस्पर्धी एंजाइम इम्युनोसे पर आधारित है।युग्मन प्रतिजन माइक्रो-वेल धारियों पर पूर्व-लेपित होते हैं।नमूने में नाइट्रोफुरन (एसईएम) और माइक्रो-वेल धारियों पर पूर्व-लेपित युग्मन एंटीजन एंटी-एसईएम एंटीबॉडी के लिए प्रतिस्पर्धा करते हैं।एंजाइम संयुग्म को जोड़ने के बाद, रंग के लिए टीएमबी सब्सट्रेट जोड़ा जाता है।नमूने के ऑप्टिकल घनत्व (OD) मान में SEM के साथ एक नकारात्मक सहसंबंध है।इस मान की तुलना मानक वक्र से की जाती है और SEM सांद्रता बाद में प्राप्त की जाती है।

 

2. तकनीकी विनिर्देश

 

संवेदनशीलता: 0.02ppb

ऊष्मायन तापमान: 25 ℃

ऊष्मायन समय: 30min～15min

पता लगाने की सीमा ऊतक, अंडा, शहद: 0.1ppb

क्रॉस-रिएक्शन दर

एसईएम 100%

एमोज़ <0.1%

एओजेड <0.1%

एएचडी <0.1%

वसूली दर

ऊतक 75±25%

शहद 70±20%

अंडा 95±25%

 

3. नाइट्रोफुरन एसईएम एलिसा खाद्य सुरक्षा परीक्षण किट अवयव

 

1	माइक्रो-वेल स्ट्रिप्स	8 हटाने योग्य के साथ 12 स्ट्रिप्स प्रत्येक कुएं
2	6 × मानक समाधान (प्रत्येक 1 एमएल)	0पीपीबी	0.02पीपीबी
		0.06पीपीबी	0.18पीपीबी
		0.54पीपीबी	1.62पीपीबी
3	एंजाइम संयुग्म	7 मिलीग्राम	लाल टोपी
4	एंटीबॉडी काम कर समाधान	7 मिलीग्राम	नीली टोपी
5	सब्सट्रेट ए	7 मिलीग्राम	सफेद टोपी
6	सब्सट्रेट बी	7 मिलीग्राम	काली टोपी
7	समाधान रोकें	7 मिलीग्राम	पीली टोपी
8	20 × केंद्रित धुलाई बफर	40 मिलीलीटर	सफेद टोपी
9	2× सांद्रित पुनर्विघटन विलयन	50 मिलीलीटर	पारदर्शी टोपी
10	2-नाइट्रोबेंजाल्डिहाइड (C7H5NO3)	10 मिली	काली टोपी

 

4. आवश्यक सामग्री लेकिन प्रदान नहीं की गई

 

1) उपकरण: माइक्रोप्लेट रीडर, प्रिंटर, होमोजेनाइज़र, नाइट्रोजन-सुखाने वाला उपकरण, भंवर, सेंट्रीफ्यूज, मापने वाले पिपेट, संतुलन (0.01 ग्राम की पारस्परिक संवेदनशीलता), इनक्यूबेटर, पानी का स्नान;

2) माइक्रोपिपेटर्स: सिंगल-चैनल 20-200μL, 100-1000μL, और मल्टी-चैनल 30～300μl;

3) अभिकर्मक: NaOH, एथिल एसीटेट, n-Hexane, HCI (लगभग 36.5%), K2HPO4·3H2O।

 

5. नमूना पूर्व उपचार

 

निर्देश

किसी भी प्रकार के नमूने के पूर्व-उपचार से पहले निम्नलिखित बिंदुओं पर विचार किया जाना चाहिए:

1) प्रयोगों के लिए केवल डिस्पोजेबल युक्तियों का उपयोग किया जा सकता है और विभिन्न अभिकर्मकों को अवशोषित करने के लिए उपयोग किए जाने पर युक्तियों को बदला जाना चाहिए;

2) प्रयोग से पहले, प्रत्येक प्रयोगात्मक उपकरण साफ होना चाहिए और यदि आवश्यक हो तो फिर से साफ किया जाना चाहिए, ताकि प्रायोगिक परिणामों में हस्तक्षेप करने वाले संदूषण से बचा जा सके।

नमूना पूर्व उपचार से पहले समाधान तैयार करना:

1) 0.1 M K2HPO4: 11.4 g K2HPO4·3H2O को विआयनीकृत पानी में 500mL तक घोलें।

2) 1 एम एचसीएल: 8.6एमएल एचसीआई (लगभग 36.5%) को विआयनीकृत पानी में 100 एमएल तक घोलें।

3) 1 M NaOH: 4g NaOH को विआयनीकृत पानी में 100mL तक घोलें।

4) 2×सांद्रित पुनर्विघटन विलयन 1:1 (1mL सांद्र पुनर्विघटन विलयन + 1mL विआयनीकृत पानी) पर विआयनीकृत पानी से पतला होता है, जिसका उपयोग नमूना पुनर्विघटन के लिए किया जाता है।

 

5.1 नमूने तैयार करना

ए) ऊतक, अंडा

1) समरूप नमूने का 1 ± 0.05 ग्राम वजन करें, प्रत्येक ट्यूब में 4 एमएल आसुत जल, 0.5एमएल 1 एम एचसीआई और 100µ एल 2-नाइट्रोबेंजाल्डिहाइड (सी7एच5एनओ3) मिलाएं, 2 मिनट के लिए ठीक से हिलाएं।

2) रात में 37 ℃ (लगभग 16 घंटे) पर सेते हैं या पानी के स्नान (2 घंटे) द्वारा 56 ℃ पर सेते हैं।

3) प्रत्येक ट्यूब में 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH और 6mL एथिल एसीटेट मिलाएं, 30 सेकंड के लिए हिलाएं।

4) 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) पर 4000r / मिनट से ऊपर सेंट्रीफ्यूज (यदि इमल्सीफिकेशन या एथिल एसीटेट परत 3 मिली के लिए पर्याप्त नहीं है, तो 80 ℃ पानी के स्नान में 10 मिनट के लिए इनक्यूबेट नमूना और बार-बार अपकेंद्रित्र; या गति बढ़ाएं और अपकेंद्रित्र का समय बढ़ाएं)।

5) एथिल एसीटेट परत के 3mL को एक नई केन्द्रापसारक ट्यूब में स्थानांतरित करें और 50 ℃ पर नाइट्रोजन या हवा से सूखने के लिए वाष्पित करें।

6) 2एमएल एन-हेक्सेन में सूखे अवशेषों को भंग करें, पतला पुनर्विघटन समाधान के 1 एमएल जोड़ें, 30 सेकंड के लिए ठीक से मिलाएं, 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) पर 4000 आर/मिनट से ऊपर सेंट्रीफ्यूज;अप-लेयर एन-हेक्सेन चरण निकालें (यदि पायसीकरण है, तो अप-लेयर एन-हेक्सेन चरण को हटाने के बाद, 10-20min के लिए 70 ℃ पानी के स्नान में इनक्यूबेट नमूना, बार-बार अपकेंद्रित्र)।

7) विश्लेषण के लिए निचले के 50 µ l को लें ।

नमूने के कमजोर पड़ने की तह: 2

बी) शहद

1) समरूप नमूने (शहद) का 2 ± 0.05 ग्राम वजन करें, प्रत्येक ट्यूब में 4एमएल आसुत जल, 0.5एमएल 1 एम एचसीआई और 100 µ एल 2-नाइट्रोबेंजाल्डिहाइड (सी7एच5एनओ3) मिलाएं, 2 मिनट के लिए ठीक से हिलाएं;

2) रात में 37 ℃ (लगभग 16 घंटे) पर सेते हैं या पानी के स्नान (2 घंटे) द्वारा 56 ℃ पर सेते हैं।

3) प्रत्येक ट्यूब में 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH और 6mL एथिल एसीटेट मिलाएं, 30 सेकंड के लिए हिलाएं।

4) 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) पर 4000r / मिनट से ऊपर अपकेंद्रित्र (यदि इमल्सीफिकेशन या एथिल एसीटेट परत 3 मिलीलीटर के लिए पर्याप्त नहीं है, तो 80 ℃ पानी के स्नान में 10 मिनट के लिए इनक्यूबेट नमूना और बार-बार अपकेंद्रित्र; या गति बढ़ाएं और अपकेंद्रित्र का समय बढ़ाएं)।

5) एथिल एसीटेट परत के 3mL को एक नई केन्द्रापसारक ट्यूब में स्थानांतरित करें और 50 ℃ पर नाइट्रोजन या हवा द्वारा सूखापन के लिए वाष्पित करें।

6) सूखे अवशेषों को 2mL N-hexane में घोलें, पतला पुनर्विघटन घोल का 1mL डालें, 30 सेकंड के लिए ठीक से मिलाएं, 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) पर 4000r / मिनट से ऊपर सेंट्रीफ्यूज करें;अप-लेयर एन-हेक्सेन चरण निकालें (यदि पायसीकरण है, तो अप-लेयर एन-हेक्सेन चरण को हटाने के बाद, 10-20min के लिए 70 ℃ पानी के स्नान में इनक्यूबेट नमूना, बार-बार अपकेंद्रित्र)।

7) विश्लेषण के लिए निचले के 50 µ l को लें ।

नमूने के कमजोर पड़ने की तह: 1

 

6. एलिसा प्रक्रियाएं

 

6.1 निर्देश

1) उपयोग करने से पहले सभी अभिकर्मकों और माइक्रो-वेल स्ट्रिप्स को कमरे के तापमान (20-25 ℃) में लाएं;

2) उपयोग के तुरंत बाद सभी अभिकर्मकों को 2-8 ℃ पर लौटा दें;

3) एलिसा विश्लेषण की पुनरुत्पादकता, काफी हद तक, प्लेट धोने की स्थिरता पर निर्भर करती है।एलिसा प्रक्रियाओं में प्लेट धोने का सही संचालन महत्वपूर्ण बिंदु है;

4) निरंतर तापमान पर ऊष्मायन के लिए, सभी नमूनों और अभिकर्मकों को प्रकाश के संपर्क से बचना चाहिए, और प्रत्येक माइक्रोप्लेट को कवर झिल्ली द्वारा सील किया जाना चाहिए।

 

6.2 संचालन प्रक्रियाएं

1) किट को कमरे के तापमान (20-25 डिग्री सेल्सियस) पर कम से कम 30 मिनट के लिए रखें, ध्यान दें कि प्रत्येक अभिकर्मक को हिलाना चाहिए और उपयोग करने से पहले अच्छी तरह मिश्रित होना चाहिए, और आवश्यक माइक्रोवेल स्ट्रिप्स को प्लेट फ्रेम में डाल दें।अप्रयुक्त माइक्रोप्लेट्स को 2-8 डिग्री सेल्सियस पर फिर से सील और संग्रहीत किया जाना चाहिए, जमे हुए नहीं।

2) घोल तैयार करना: 20 × सांद्रित धुलाई बफर का 40 एमएल लें और इसे 1:19 पर विआयनीकृत पानी से पतला करें (20 × सांद्रित धुलाई बफर का 1 भाग + विआयनीकृत पानी का 19 भाग)।या आवश्यकतानुसार तैयार करें।

3) नंबरिंग: नमूनों और मानक समाधानों के अनुसार माइक्रोवेल की संख्या;प्रत्येक नमूना और मानक समाधान दो प्रतियों में बनाया जाना चाहिए, और उनकी स्थिति दर्ज की जानी चाहिए।

4) डुप्लीकेट कुओं के लिए नमूना या मानक समाधान के 50µ एल जोड़ें;प्रत्येक अच्छी तरह से एंजाइम संयुग्म के 50ul जोड़ें, फिर 50µ एल एंटीबॉडी काम कर समाधान जोड़ें, और धीरे से मिश्रण करने के लिए प्लेट को हिलाएं।एक कवर फिल्म के साथ माइक्रोप्लेट को सील करें और 30 मिनट के लिए 25 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें।

5) माइक्रोवेल में तरल डालें, अब्सॉर्बेंट पेपर पर थपथपाकर सुखाएं, माइक्रोवेल प्लेट को 15-30 सेकेंड तक धोने के लिए 250 μL/वेल वॉशिंग बफर डालें, फिर बाहर निकालें और अब्सॉर्बेंट पेपर से सुखाएं, 4-5 बार दोहराएं।(यदि टैप करने के बाद हवाई बुलबुले हैं, तो उन्हें साफ टिप से काट लें)।

6) रंग विकास: सब्सट्रेट A के 50 µ l और सब्सट्रेट B के 50 µ l को प्रत्येक कुएं में जोड़ें ।धीरे से मिलाने के लिए प्लेट को हाथ से हिलाएं और रंग के विकास के लिए अंधेरे में 15 मिनट के लिए 25 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट करें।

7) परख: प्रत्येक कुएं में 50 μL स्टॉप सॉल्यूशन जोड़ें।प्लेट को हाथ से हिलाते हुए धीरे से मिलाएं।प्रत्येक कुएं का ओडी मान निर्धारित करने के लिए माइक्रोप्लेट रीडर की तरंगदैर्घ्य को 450 एनएम पर सेट करें ।(5 मिनट के भीतर दोहरी तरंग दैर्ध्य 450/630nm पर OD मान पढ़ने की अनुशंसा की जाती है)।

 

7. परिणाम निर्णय

 

परिणामों को आंकने की दो विधियाँ हैं: पहला एक मोटा निर्णय है, जबकि दूसरा मात्रात्मक निर्धारण है।ध्यान दें कि नमूने के OD मान का SEM की सामग्री के साथ नकारात्मक संबंध है।

7.1 गुणात्मक निर्धारण

मानक समाधान के साथ नमूने के औसत आयुध डिपो मूल्य की तुलना करके एकाग्रता रेंज (एनजी / एमएल) प्राप्त की जा सकती है।यह मानते हुए कि नमूने का OD मान 0.3 है, और नमूने का 1.0ppb है, मानक समाधान का OD मान है: 0ppb के लिए 2.243, 0.02ppb के लिए 1.816, 0.06ppb के लिए 1.415, 0.18ppb के लिए 0.74, 0.54 के लिए 0.313 पीपीबी, 1.62 पीपीबी के लिए 0.155, तदनुसार नमूने की एकाग्रता सीमा 0.54 से 1.62 पीपीबी है, और नमूने की 0.06 से 0.18 पीपीबी है।

7.2 मात्रात्मक निर्धारण

अवशोषण मानों का माध्य मान नमूने के औसत OD मान (B) के लिए प्राप्त किया जाता है और मानक समाधान को पहले मानक समाधान (0 मानक) के OD मान (B0) से विभाजित किया जाता है और बाद में 100% से गुणा किया जाता है, अर्थात ,

अवशोषण मूल्य का प्रतिशत =	बी	×100%
	बी0

बी-नमूने या मानक समाधान का औसत (डबल कुएं) ओडी मूल्य

B0—0ng/mL मानक समाधान का औसत OD मान

मानक समाधान के अवशोषण प्रतिशत और SEM मानक समाधान (ng/mL) के सेमीलॉगरिदम मानों को क्रमशः Y- और X-अक्ष के रूप में मानक वक्र बनाएं।मानक वक्र में इसके अवशोषण प्रतिशत को शामिल करके नमूने की संगत सांद्रता को मानक वक्र से पढ़ें।परिणामी मूल्य को बाद में संबंधित कमजोर पड़ने वाले गुना से गुणा किया जाता है, अंत में नमूने में SEM एकाग्रता प्राप्त करना।

 

8. सावधानियां

 

1) यदि कमरे का तापमान 25 ℃ या अभिकर्मक तापमान से कम है और नमूना कमरे के तापमान (20-25 ℃) पर वापस नहीं आता है, तो मानक OD मान गिर जाएगा।

2) धोने की प्रक्रिया के दौरान, माइक्रोप्लेट के सुखाने के साथ मानक वक्र की गैर-रैखिकता होगी, और पुनरुत्पादन आदर्श नहीं है;इसलिए, धोने के तुरंत बाद अगले चरण पर आगे बढ़ें।

3) अच्छी तरह मिलाएं, अन्यथा प्रजनन क्षमता खराब होगी।

4) स्टॉप सॉल्यूशन 2 एम सल्फ्यूरिक एसिड सॉल्यूशन है, त्वचा के संपर्क से बचें।

5) शेल्फ लाइफ से परे किट का उपयोग न करें।किट से मिलावटी या मिलावटी अभिकर्मकों के उपयोग के परिणामस्वरूप संवेदनशीलता और ओडी मूल्यों का पता लगाने में परिवर्तन हो सकता है।किट के विभिन्न बैचों में अभिकर्मकों को प्रतिस्थापित न करें।

6) अप्रयुक्त माइक्रोप्लेट्स को जिपलॉक बैग में फिर से सील करें।मानक समाधान और रंगहीन कप्लर्स प्रकाश के प्रति संवेदनशील होते हैं और इन्हें सीधे प्रकाश के संपर्क में नहीं लाया जा सकता है।

7) किसी भी रंग के घोल को छोड़ दें जिसका रंग इंगित करता है कि घोल ख़राब हो गया है।मानक समाधान 1 (0 पीपीबी) के लिए 0.5 से कम का पता लगाने का मान गिरावट का संकेत देता है।

8) इष्टतम प्रतिक्रिया तापमान 25 ℃ है, और तापमान बहुत अधिक या बहुत कम होने पर पता लगाने की संवेदनशीलता और OD मान बदल जाएगा।

 

9. भंडारण और समाप्ति तिथि

 

भंडारण: 2-8 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें, फ्रीज न करें।
समाप्ति तिथि: 12 महीने;उत्पादन की तारीख बॉक्स पर है।
नोट: यदि माइक्रोप्लेट वैक्यूम पैकेजिंग लीक हो जाती है, तो इसका उपयोग अभी भी परीक्षण के परिणामों को प्रभावित किए बिना किया जा सकता है, इसलिए आप इसे विश्वास के साथ उपयोग कर सकते हैं।

 

Q1: इसे कब भेज दिया जाएगा?
ए 1: हम भुगतान प्राप्त करने के बाद 7 कार्य दिवसों के भीतर जितनी जल्दी हो सके आपके लिए सामान भेज देंगे।(महामारी जैसे बाहरी कारकों के मामले में, डिलीवरी में देरी हो सकती है)

 

प्रश्न 2: क्या यह OEM / ODM का समर्थन करता है?
ए 2: इसका समर्थन किया जा सकता है, लेकिन विशिष्ट मात्रा को 100,000 से अधिक टुकड़े होने की आवश्यकता है, जो अनुकूलित उत्पादों के लिए सुविधाजनक है।

 

प्रश्न 3: गुणवत्ता नियंत्रण के मामले में आपका कारखाना कैसा चल रहा है?
A3: हमारे पास राष्ट्रीय स्तर पर ISO9001 और ISO13485 प्रमाणित है।हमारी उत्पादन प्रक्रिया इष्टतम उत्पाद गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए मानक प्रक्रियाओं के अनुरूप है।

 

Q4: बिक्री के बाद सेवा कैसे प्रदान करें?
ए 4: हम पेशेवर ऑनलाइन तकनीकी बिक्री के बाद सेवा प्रदान करते हैं।हम आपको वीडियो, टेलीफोन आदि के माध्यम से आमने-सामने मार्गदर्शन प्रदान कर सकते हैं।

 

Q5: भुगतान विधि क्या है?
ए 5: हम टी / टी द्वारा भुगतान प्राप्त करते हैं।

 

Q6: कैसे जहाज करने के लिए?
A6: हमारे कई सहकारी वाहकों से उद्धरण प्राप्त करके आपके लिए सबसे अच्छी शिपिंग विधि चुनें, और अपनी आवश्यकताओं के अनुसार जहाज भी भेजें।