दूध अंडा मूत्र सीरम फ़ीड 96 कुओं/किट के लिए फेनिलएथेनॉलमाइन एक एलिसा परीक्षण किट

दूध अंडा मूत्र सीरम फ़ीड 96 कुओं/किट के लिए फेनिलएथेनॉलमाइन एक एलिसा परीक्षण किट

 

1. सिद्धांत

परीक्षण किट नमूने में फेनिलएथेनॉलमाइन ए का पता लगाने के लिए प्रतिस्पर्धी एंजाइम इम्युनोसे पर आधारित है।संयुग्मित प्रतिजन सूक्ष्म कुएं की धारियों पर पूर्व-लेपित होता है।नमूने में फेनिलएथेनॉलमाइन ए और माइक्रो-वेल स्ट्राइप्स पर पूर्व-लेपित युग्मन एंटीजन एंटी-फेनिलथेनॉलमाइन ए एंटीबॉडी के लिए प्रतिस्पर्धा करते हैं।एंजाइम संयुग्म को जोड़ने के बाद, रंग के लिए टीएमबी सब्सट्रेट जोड़ा जाता है।नमूने के ऑप्टिकल घनत्व (OD) मान का नमूने में फेनिलएथेनॉलमाइन ए एकाग्रता के साथ नकारात्मक संबंध है।मान की तुलना मानक वक्र से की जाती है और फेनिलएथेनॉलमाइन ए सांद्रता बाद में प्राप्त की जाती है।

 

2. तकनीकी विनिर्देश

संवेदनशीलता: 0.1 पीपीबी
इनक्यूबेटर तापमान: 25℃
इनक्यूबेटर समय: 30मिनट～15मिनट

पहचान सीमा
ऊतक 0.2 पीपीबी
फ़ीड 0.5 पीपीबी

क्रॉस-रिएक्शन:
फेनिलएथेनॉलमाइन ए 100%
रेक्टोपामाइन <1%
सालबुटामोल <1%
Clenbuterol <1%
वसूली दर
ऊतक, फ़ीड 85 ± 25%

 

3. अवयव

 

1	माइक्रो-वेल स्ट्रिप्स	8 हटाने योग्य के साथ 12 स्ट्रिप्स प्रत्येक कुएं
2	6 × मानक समाधान (प्रत्येक 1 एमएल)	0पीपीबी	0.1 पीपीबी
		0.3 पीपीबी	0.9पीपीबी
		2.7पीपीबी	8.1पीपीबी
3	एंजाइम संयुग्म	7 मिलीग्राम	लाल टोपी
4	एंटीबॉडी काम कर समाधान	7 मिलीग्राम	नीली टोपी
5	सब्सट्रेट ए	7 मिलीग्राम	सफेद टोपी
6	सब्सट्रेट बी	7 मिलीग्राम	काली टोपी
7	समाधान रोकें	7 मिलीग्राम	पीली टोपी
8	20 × केंद्रित धुलाई बफर	40 मिलीलीटर	सफेद टोपी
9	2× सांद्रित पुनर्विघटन विलयन	50 मिलीलीटर	पारदर्शी टोपी

 

4. आवश्यक सामग्री लेकिन प्रदान नहीं की गई

1) उपकरण: माइक्रोप्लेट रीडर, प्रिंटर, होमोजेनाइज़र, नाइट्रोजन-सुखाने वाला उपकरण, थरथरानवाला, अपकेंद्रित्र, मापने वाला पिपेट, संतुलन (0.01 ग्राम की पारस्परिक संवेदनशीलता), इनक्यूबेटर।
2) माइक्रोपिपेटर्स: सिंगल-चैनल 20-200 µ l और 100-1000 µ l, और मल्टी-चैनल 30-300 µ l;
3) अभिकर्मक: एथिल एसीटेट, एन-हेक्सेन, ग्लेशियल एसिटिक एसिड

 

5. नमूना पूर्व उपचार

निर्देश (पूर्व उपचार से पहले निम्नलिखित बातों पर ध्यान दिया जाना चाहिए)
1) प्रयोगों के लिए केवल डिस्पोजेबल युक्तियों का उपयोग किया जा सकता है और विभिन्न अभिकर्मकों को अवशोषित करने के लिए उपयोग किए जाने पर युक्तियों को बदला जाना चाहिए;
2) प्रयोग से पहले, प्रत्येक प्रयोगात्मक बर्तन साफ ​​होना चाहिए और यदि आवश्यक हो तो फिर से साफ किया जाना चाहिए, ताकि प्रायोगिक परिणामों में हस्तक्षेप करने वाले संदूषण से बचा जा सके।

नमूना पूर्व उपचार से पहले समाधान तैयार करना:
1) नमूना निकालने का घोल: 99 मिली एथिल एसीटेट लें, 1 मिली ग्लेशियल एसिटिक एसिड डालें और अच्छी तरह मिलाएँ।
2) नमूना पुनर्विघटन समाधान: 2 × सांद्रित पुनर्विघटन समाधान 1:1 (1mL केंद्रित पुनर्विघटन समाधान + 1mL विआयनीकृत पानी) पर विआयनीकृत पानी से पतला होता है, जिसका उपयोग नमूना पुनर्विघटन के लिए किया जाता है।

नमूने तैयार करना
5.1 फ़ीड
1. नमूना पीसें, 1.0 ± 0.05 ग्राम को 50 मिली सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में लें;
2. 10 एमएल नमूना निकालने का समाधान जोड़ें, 3 मिनट के लिए थरथरानवाला के साथ हिलाएं;
3. 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर 4000 r/मिनट पर केंद्रापसारक;
4. 2 मिलीलीटर सतह पर तैरनेवाला लें, 50-60 ℃ पर नाइट्रोजन या हवा के साथ सूखने के लिए झटका दें;
5. 1 मिलीलीटर एन-हेक्सेन जोड़ें, फिर 1 मिलीलीटर नमूना पुनर्विघटन समाधान जोड़ें, 30 के लिए हिलाएं;
6. 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर 4000 r/मिनट पर केंद्रापसारक, ऊपर परत कार्बनिक चरण को हटा दें ।
7. विश्लेषण के लिए 20 डिग्री सेल्सियस डाउन-लेयर लें।
नमूना के कमजोर पड़ने की तह: 5
(क्योंकि नमूना गड़बड़ी है, नमूना कट ऑफ मान के रूप में 2PPB की सिफारिश करें।)

5.2 ऊतक
1. एक 50 मिलीलीटर अपकेंद्रित्र ट्यूब में सजातीय ऊतक का नमूना 2.0 ± 0.05 ग्राम लें;
2. 8 एमएल नमूना निकालने का समाधान जोड़ें, 2 मिनट के लिए थरथरानवाला के साथ हिलाएं;
3. 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर 4000 r/मिनट पर केंद्रापसारक;
4. 2 मिलीलीटर सतह पर तैरनेवाला लें, 50-60 ℃ पर नाइट्रोजन या हवा के साथ सूखने के लिए झटका दें;
5. 1 मिलीलीटर एन-हेक्सेन जोड़ें, फिर 1 मिलीलीटर नमूना पुनर्विघटन समाधान जोड़ें, 30 के लिए हिलाएं;
6. 10 मिनट के लिए कमरे के तापमान पर 4000 r/मिनट पर केंद्रापसारक, ऊपर परत कार्बनिक चरण को हटा दें ।
7. विश्लेषण के लिए 20 डिग्री सेल्सियस डाउन-लेयर लें।
नमूना के कमजोर पड़ने की तह: 2
(क्योंकि नमूना गड़बड़ी है, नमूना कट ऑफ मान के रूप में 1PPB की सिफारिश करें।)

 

6. एलिसा प्रक्रियाएं

6.1 निर्देश
1. उपयोग करने से पहले सभी अभिकर्मकों और माइक्रो-वेल स्ट्रिप्स को कमरे के तापमान (20-25 ℃) में लाएं।
2. उपयोग के तुरंत बाद सभी अभिकर्मकों को 2-8 ℃ पर लौटा दें।
3. एलिसा विश्लेषण की पुनरुत्पादकता, काफी हद तक, प्लेट धोने की स्थिरता पर निर्भर करती है।एलिसा की प्रक्रियाओं में प्लेट धोने का सही संचालन प्रमुख बिंदु है।
4. निरंतर तापमान पर ऊष्मायन के लिए, सभी नमूनों और अभिकर्मकों को प्रकाश के संपर्क से बचना चाहिए, और प्रत्येक माइक्रोप्लेट को कवर झिल्ली द्वारा सील किया जाना चाहिए।

6.2 संचालन प्रक्रियाएं
1. कम से कम 30 मिनट के लिए कमरे के तापमान (20-25 ℃) के लिए परीक्षण किट लाओ, ध्यान दें कि उपयोग से पहले समान रूप से मिश्रण करने के लिए प्रत्येक तरल अभिकर्मक को हिलाया जाना चाहिए।
2. समाधान की तैयारी: 1:19 (1 भाग 20 × केंद्रित वाशिंग बफर + 19 भाग विआयनीकृत पानी) पर विआयनीकृत पानी के साथ 40 मिलीलीटर 20 × केंद्रित वाशिंग बफर पतला करें, या आवश्यक मात्रा के रूप में तैयार करें।
3. आवश्यक माइक्रो-वेल स्ट्रिप्स को प्लेट फ्रेम में रखें।अप्रयुक्त माइक्रोप्लेट को फिर से सील कर दिया, 2-8 ℃ पर संग्रहीत, जमे हुए नहीं।
4. क्रमांकन: नमूनों और मानक समाधान के अनुसार सूक्ष्म कुओं की संख्या;प्रत्येक नमूना और मानक समाधान दो प्रतियों में किया जाना चाहिए;उनके पदों को रिकॉर्ड करें।
5. अलग डुप्लिकेट कुओं में नमूना या मानक समाधान के 50 µ एल जोड़ें;एंजाइम संयुग्म के 50 µ एल जोड़ें, फिर प्रत्येक कुएं में एंटीबॉडी काम कर रहे समाधान के 50 µ एल जोड़ें, कवर झिल्ली के साथ माइक्रोप्लेट को सील करें, और 30 मिनट के लिए 25 ℃ पर इनक्यूबेट करें।
6. माइक्रोवेल से तरल डालें, सोखने वाले कागज पर सूखने के लिए फ्लैप करें;विआयनीकृत पानी का 250 µ l/वेल डालें, 15-30 सेकंड के लिए धोएं, फिर बाहर निकालें और शोषक कागज के साथ सूखने के लिए फ्लैप करें, 4-5 बार दोहराएं।
7. रंगाई: सब्सट्रेट एक समाधान के 50 µ एल जोड़ें, प्रत्येक अच्छी तरह से बी समाधान के 50 µ एल.प्लेट को मैन्युअल रूप से मिलाते हुए धीरे से मिलाएं, और रंग के लिए अंधेरे में 25 ℃ for15 मिनट पर इनक्यूबेट करें ।
8. निर्धारण: प्रत्येक कुएं में स्टॉप सॉल्यूशन के 50 µ l को जोड़ें ।प्लेट को हाथ से हिलाकर धीरे से मिलाएं।प्रत्येक कुएं के आयुध डिपो मान को निर्धारित करने के लिए माइक्रोप्लेट रीडर की तरंगदैर्घ्य को 450 एनएम पर सेट करें ।(5 मिनट के भीतर दोहरे तरंग दैर्ध्य 450/630 एनएम पर आयुध डिपो मूल्य को पढ़ने की सिफारिश करें)।

 

7. परिणाम निर्णय

परिणामों का न्याय करने के दो तरीके हैं;पहला एक मोटा निर्णय है, जबकि दूसरा मात्रात्मक निर्धारण है।ध्यान दें कि नमूने के OD मान का नमूने में Phenylethanolamine A के साथ ऋणात्मक सहसंबंध है।

7.1 गुणात्मक निर्धारण
मानक समाधान के साथ नमूने के औसत आयुध डिपो मूल्य की तुलना करते हुए एकाग्रता रेंज (एनजी / एमएल) प्राप्त की जा सकती है।यह मानते हुए कि नमूने का OD मान 0.3 है, और नमूने का 1.0 1.0 है, मानक समाधानों का OD मान है: 0ppb के लिए 2.243, 0.1ppb के लिए 1.866, 0.3ppb के लिए 1.415, 0.9ppb के लिए 0.864, 2.7ppb के लिए 0.413 8.1ppb के लिए 0.155, तदनुसार नमूने की एकाग्रता सीमा 0.3 से 0.9ppb है, और नमूना की 2.7ppb से 8.1ppb है।

7.2 मात्रात्मक निर्धारण
नमूने के औसत OD मान (B) के लिए प्राप्त अवशोषण मानों का माध्य मान और पहले मानक समाधान (0 मानक) के OD मान (B0) से विभाजित मानक समाधान और बाद में 100% से गुणा किया जाता है, अर्थात

 

अवशोषण मूल्य का प्रतिशत =	बी	×100%
	बी0

 

B—नमूने का औसत OD मान या मानक समाधान
B0—0 एनजी/एमएल मानक समाधान का औसत ओडी मान
मानक समाधान के अवशोषण प्रतिशत के साथ मानक वक्र बनाएं और फेनिलएथेनॉलमाइन ए के सेमीलॉगरिथम मानों को क्रमशः वाई- और एक्स-अक्ष के रूप में मानक समाधान (एनजी/एमएल) बनाएं।मानक वक्र में इसके अवशोषण प्रतिशत को शामिल करके नमूने की संगत सांद्रता को मानक वक्र से पढ़ें।परिणामी मूल्य को बाद में संबंधित कमजोर पड़ने वाले गुना से गुणा किया जाता है, अंत में नमूने में फेनिलएथेनॉलमाइन ए की वास्तविक एकाग्रता प्राप्त होती है।
इस किट के पेशेवर विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग करना बड़ी मात्रा में नमूनों के सटीक और तेजी से विश्लेषण के लिए अधिक सुविधाजनक होगा।(इस सॉफ्टवेयर के लिए कृपया हमसे संपर्क करें)

8. सावधानियां

1. कमरे का तापमान 25 ℃ से नीचे या अभिकर्मकों का तापमान और नमूने कमरे के तापमान (20-25 ℃) में वापस नहीं आने से मानक OD मान कम हो जाएगा।
2. धोने की प्रक्रिया में माइक्रोप्लेट का सूखापन गैर-रैखिक मानक वक्रों और अवांछनीय प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता सहित स्थितियों के साथ होगा;तो धोने के तुरंत बाद अगले चरण पर जाएं।
3. समान रूप से मिलाएं, प्लेट को पूरी तरह से धोएं, एलिसा विश्लेषण की पुनरुत्पादकता, काफी हद तक, प्लेट धोने की स्थिरता पर निर्भर करती है।
4. स्टॉप समाधान 2 एम सल्फ्यूरिक एसिड समाधान है, त्वचा से संपर्क करने से बचें।
5. किट की समाप्ति तिथि से अधिक का उपयोग न करें।किट से मिलावटी या मिलावटी अभिकर्मकों के उपयोग से संवेदनशीलता और पता लगाने वाले OD मानों में परिवर्तन होगा।उपयोग करने के लिए विभिन्न लॉट नंबरों की किट से अभिकर्मकों का आदान-प्रदान न करें।
6. अप्रयुक्त माइक्रोप्लेट को फिर से सील करने के लिए ऑटो-सीलिंग बैग में डालें।मानक पदार्थ और रंगहीन रंग पूर्व प्रकाश संवेदनशील है, और इस प्रकार वे सीधे प्रकाश के संपर्क में नहीं आ सकते हैं।
7. किसी भी ऐसे रंग से रंगने वाले घोल को त्यागें जो इस घोल के अध: पतन को इंगित करता हो।0.5 (ए450 एनएम< 0.5 ) से कम के 0 मानक सॉल्यूटिन का पता लगाने का मूल्य इसके अध: पतन को इंगित करता है।
8. इष्टतम प्रतिक्रिया तापमान 25 ℃ है, और बहुत अधिक या निम्न तापमान के परिणामस्वरूप संवेदनशीलता और OD मानों का पता लगाने में परिवर्तन होगा।

9. भंडारण और समाप्ति तिथि

भंडारण: 2-8 ℃ पर स्टोर करें, जमे हुए नहीं।
समाप्ति तिथि: 12 महीने;उत्पादन की तारीख बॉक्स पर है।
नोट: यदि माइक्रोप्लेट के वैक्यूम पैकेज में रिसाव है, तो यह अभी भी उपयोग करने के लिए मान्य है, परीक्षण के परिणाम को प्रभावित न करें, उपयोग करने के लिए आराम करें।

 

 

 

 

 

Q1: इसे कब भेज दिया जाएगा?
ए 1: हम भुगतान प्राप्त करने के बाद 7 कार्य दिवसों के भीतर जितनी जल्दी हो सके आपके लिए सामान भेज देंगे।(महामारी जैसे बाहरी कारकों के मामले में, डिलीवरी में देरी हो सकती है)

 

प्रश्न 2: क्या यह OEM / ODM का समर्थन करता है?
ए 2: इसका समर्थन किया जा सकता है, लेकिन विशिष्ट मात्रा को 100,000 से अधिक टुकड़े होने की आवश्यकता है, जो अनुकूलित उत्पादों के लिए सुविधाजनक है।

 

प्रश्न 3: गुणवत्ता नियंत्रण के मामले में आपका कारखाना कैसा चल रहा है?
A3: हमारे पास राष्ट्रीय स्तर पर ISO9001 और ISO13485 प्रमाणित है।हमारी उत्पादन प्रक्रिया इष्टतम उत्पाद गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए मानक प्रक्रियाओं के अनुरूप है।

 

Q4: बिक्री के बाद सेवा कैसे प्रदान करें?
ए 4: हम पेशेवर ऑनलाइन तकनीकी बिक्री के बाद सेवा प्रदान करते हैं।हम आपको वीडियो, टेलीफोन आदि के माध्यम से आमने-सामने मार्गदर्शन प्रदान कर सकते हैं।

 

Q5: भुगतान विधि क्या है?
ए 5: हम टी / टी द्वारा भुगतान प्राप्त करते हैं।

 

Q6: कैसे जहाज करने के लिए?
A6: हमारे कई सहकारी वाहकों से उद्धरण प्राप्त करके आपके लिए सबसे अच्छी शिपिंग विधि चुनें, और अपनी आवश्यकताओं के अनुसार जहाज भी भेजें।