वायरस रेबीज कैनाइन एलिसा टेस्ट किट 96 वेल्स/किट आईएसओ9001 एंटीबॉडी

पालतू जानवरों के लिए रेबीज वायरस एंटीबॉडी एलिसा किट 96 वेल्स/किट जीएमपी आईएसओ9001

1 परिचय

रेबीज वायरस (आरबीवी) एंटीबॉडी एलिसा किट का उपयोग कुत्तों, बिल्लियों आदि के सीरम में रेबीज वायरस एंटीबॉडी का परीक्षण करने के लिए किया जाता है, जिसका उपयोग रेबीज टीकाकरण की स्थिति का आकलन करने के लिए किया जाता है।
यह किट ब्लॉक एलिसा विधि का उपयोग करती है, रेबीज एंटीजन एंजाइम माइक्रो-वेल स्ट्रिप्स पर पूर्व-लेपित है।परीक्षण करते समय, पतला सीरम नमूना जोड़ें, ऊष्मायन के बाद, यदि रेबीज वायरस विशिष्ट एंटीबॉडी है, तो यह पूर्व-लेपित एंटीजन के साथ संयोजन करेगा, असंबद्ध एंटीबॉडी और धोने के साथ अन्य घटकों को त्याग देगा;फिर एंजाइम युक्त एंटी-रेबीज वायरस मोनोक्लोनल एंटीबॉडी जोड़ें, नमूना ब्लॉक में एंटीबॉडी मोनोक्लोनल एंटीबॉडी और पूर्व-लेपित एंटीजन का संयोजन;धोने के साथ असंबद्ध एंजाइम संयुग्म को त्यागें;सूक्ष्म कुओं में टीएमबी सब्सट्रेट जोड़ें, एंजाइम कटैलिसीस द्वारा ब्लू सिग्नल नमूना में एंटीबॉडी सामग्री के विपरीत अनुपात में है, प्रतिक्रिया को रोकने के लिए स्टॉप समाधान जोड़ने के बाद प्रतिक्रिया कुओं में अवशोषण ए मान को मापने के लिए 450 एनएम वेवलेंथ पर एलिसा रीडर का उपयोग करें।

2. अभिकर्मकों और सामग्री

3. आवश्यक सामग्री प्रदान नहीं की गई

1) माइक्रोपिपेट: 10ul-100ul, 100ul-1000ul।
2) डिस्पोजेबल पिपेट युक्तियाँ।
3) ग्रेजुएट: 500 मि.ली.
4) माइक्रोप्लेट रीडर: 96 कुएं।
5) आसुत जल या विआयनीकृत जल।
6) माइक्रोप्लेट वॉशर

4. नमूना तैयार करना

पशु का संपूर्ण रक्त लें, नियमित विधि का उपयोग करके सीरम प्राप्त करें, सीरम चमकीला होना चाहिए और हेमोलिसिस नहीं होना चाहिए

5. बफर तैयारी धोना

उपयोग से पहले कमरे के तापमान में 10X केंद्रित वाशिंग बफर लौटाएं, यदि नमक के क्रिस्टल हैं, तो इसे भंग करने के लिए हिलाएं, फिर इसे आसुत जल या विआयनीकृत पानी से 10 बार पतला करें।पतला धुलाई बफर लगभग 1 सप्ताह के लिए 4 ℃ पर स्टोर कर सकता है।

6. नोट्स

1) उपयोग से पहले सभी अभिकर्मकों को कमरे के तापमान में लौटा दें, उपयोग करने से पहले इसे समान रूप से हिलाएं, और उपयोग के बाद 2-8 ℃ तक स्टोर करें।
2) अलग-अलग किट और अलग-अलग लॉट नं से अभिकर्मकों का उपयोग न करें, उपयोग करते समय अभिकर्मकों को प्रदूषित होने से रोकें।
3) सब्सट्रेट ए और स्टॉप सॉल्यूशन से त्वचा और आंखों में जलन हो सकती है, उपयोग करने में सावधानी बरतें।
4) सब्सट्रेट को तेज रोशनी में न रखें और ऑक्सीडेंट के संपर्क से बचें।
5) आरबीवी-एजी कोटेड प्लेट्स को सीलबंद और नमी-प्रूफ होना चाहिए।अप्रयुक्त माइक्रोवेल प्लेट को सूखे पन्नी बैग में वापस रखें और 2 ~ 8 ℃ पर सील करें।
6) फेंकने से पहले सभी कचरे को अच्छी तरह से उपचारित किया जाना चाहिए ताकि खींचने से बचा जा सके।
7) ऑपरेटिंग निर्देशों के सख्त अनुपालन से सर्वोत्तम परिणाम प्राप्त हो सकते हैं।पाइपिंग ऑपरेशन, समय और पूरी प्रक्रिया की धुलाई सटीक होनी चाहिए।
8) RBV-Ag कोटेड प्लेट डिस्पोजेबल हैं, दोबारा उपयोग न करें।

7. परीक्षण प्रक्रिया

1) प्रत्येक परीक्षण के लिए, सकारात्मक नियंत्रण के लिए 1 कुआँ और नकारात्मक नियंत्रण के लिए 2 कुएँ सेट करें, नकारात्मक नियंत्रण और सकारात्मक नियंत्रण को पतला करने की आवश्यकता नहीं है, सीधे इसके संबंधित कुओं, 100ul / कुएं में जोड़ें;
2) प्रतिक्रिया कुओं में पतला नमूना जोड़ें, 80ul / अच्छी तरह से, फिर सीरम, 20ul / अच्छी तरह से जोड़ें, उड़ाएं और इसे भी हरा दें।(टिप्स का उपयोग न करें);
3) इसे चिपकने वाली पन्नी के साथ कवर करें, 37 ℃ को 30 मिनट के लिए इनक्यूबेट करें;
4) चिपकने वाली पन्नी खोलें, कुएं के तरल को त्यागें, प्रत्येक कुएं में पतला वाशिंग बफर जोड़ें, 250ul / अच्छी तरह से, तरल को त्यागें, उपरोक्त चरण को 5 बार दोहराएं, शोषक कागज के साथ सूखने के लिए अंतिम फ्लैप पर;
5) एंजाइम संयुग्म, 100ul / अच्छी तरह से जोड़ना, इसे चिपकने वाली पन्नी के साथ कवर करें, 30 मिनट के लिए 37 ℃ से ​​इनक्यूबेट करें;
6) चिपकने वाली पन्नी खोलें, कुएं के तरल को त्यागें, चरण 4 के रूप में 5 बार धोएं), शोषक कागज के साथ सुखाने के लिए अंतिम फ्लैप पर याद रखें;
7) सब्सट्रेट, 100ul / अच्छी तरह से जोड़ें, इसे समान रूप से मिलाएं फिर इसे चिपकने वाली पन्नी के साथ कवर करें, 15 मिनट के लिए अंधेरे में 37 ℃ सेते रहें;
8) प्रतिक्रिया को रोकने के लिए स्टॉप सॉल्यूशन, 50ul/well जोड़ें, परिणाम को 10 मिनट में मापें।

8. परिणाम निर्णय

450 एनएम (संदर्भ के रूप में 630 एनएम) पर ओडी मान पढ़ें।
परख के लिए वैध होने के लिए:
नकारात्मक नियंत्रण (एन)> 0.5 का ओडी मूल्य, इस बीच सकारात्मक मूल्य (पी) अवरोधन दर> 60%
गणना विधि:
पीआई (अवरुद्ध दर) = 1- (नमूना ओडी मूल्य / नकारात्मक नियंत्रण ओडी औसत मूल्य)
परिणाम व्याख्या
पीआई (अवरुद्ध दर)> 60%: सकारात्मक
पीआई (अवरुद्ध दर) ≤60%: नकारात्मक
(ध्यान दें: जब पीआई = 60%, इसका मतलब एंटीबॉडी टिटर 0.5 आईयू/एमएल है)

9. भंडारण और समाप्ति तिथि

अंधेरे में 2 ~ 8 ℃ पर स्टोर करें, कोई जमी नहीं, समाप्ति तिथि: 12 महीने।

रोगजनन

- यह मुख्य रूप से रेबीज वायरस के जानवरों के माध्यम से मनुष्यों में संचरण के कारण होता है।रेबीज वायरस में पांच प्रोटीन होते हैं, अर्थात् ग्लाइकोप्रोटीन (जी), न्यूक्लियोप्रोटीन (एन), पोलीमरेज़ (एल), फॉस्फोप्रोटीन (एनएस) और मैट्रिक्स (एम)।रेबीज वायरस का ग्लाइकोप्रोटीन एसिटाइलकोलाइन के साथ संयोजन कर सकता है, जो रेबीज वायरस के न्यूरोटिसिज्म को निर्धारित करता है।संक्रमण का मुख्य स्रोत बीमार कुत्ते हैं, इसके बाद बीमार बिल्लियाँ और बीमार भेड़िये हैं।किसी बीमार जानवर के काटने के बाद, जानवर की लार में मौजूद वायरस घाव के माध्यम से मानव शरीर में प्रवेश करता है और बीमारी का कारण बनता है।कुछ रोगी बीमार भी हो सकते हैं क्योंकि कंजंक्टिवा बीमार जानवर की लार से दूषित हो जाता है।

- आम तौर पर लोग रेबीज के लिए अतिसंवेदनशील होते हैं, जबकि शिकारी, पशु चिकित्सक और पशु प्रजनक अधिक संवेदनशील होते हैं।रेबीज वायरस मानव शरीर में प्रवेश करने के बाद, यह पहले मांसपेशियों की कोशिकाओं को संक्रमित करता है, घाव के पास की मांसपेशियों की कोशिकाओं में थोड़ी मात्रा में फैलता है, और फिर पास की परिधीय नसों पर आक्रमण करता है।फिर, वायरस परिधीय तंत्रिका की धुरी के साथ केंद्रीय तंत्रिका में फैलता है, और रक्त तक नहीं फैलता है।यह मुख्य रूप से मस्तिष्क के तने और सेरिबैलम में न्यूरॉन्स पर आक्रमण करता है।वायरस बड़ी मात्रा में ग्रे मैटर में प्रतिकृति बनाता है और लार ग्रंथि, कॉर्निया, नाक म्यूकोसा, फेफड़े, त्वचा और तंत्रिका के साथ अन्य भागों में पहुंचता है।मेजबान को रेबीज वायरस का मुख्य नुकसान एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम से होता है, जो सेल में इसके छोड़े गए प्रोटीन शेल के संचय से बनने वाले ईोसिनोफिलिक कण होते हैं।एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम व्यापक रूप से रोगियों के केंद्रीय तंत्रिका कोशिकाओं में वितरित किया जाता है, और रोग के प्रयोगशाला निदान का एक संकेतक भी है।

-संक्रमण के बाद सभी लोग बीमार नहीं होंगे।लगभग 15% - 20% लोग जो बिना निवारक इंजेक्शन के बीमार कुत्तों द्वारा काटे जाते हैं, बीमार हो जाते हैं, और लगभग 50% - 60% लोग बीमार भेड़ियों द्वारा काटे जाते हैं, बीमार हो जाते हैं।घटना कारक काटने की जगह, घाव की डिग्री, घाव के उपचार, कपड़ों की मोटाई और टीकाकरण से संबंधित हैं।

Q1: आपको शिप करने में कितना समय लगेगा?
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Q5: अपने न्यूनतम आदेश मात्रा क्या है?
ए 5: 1किट।

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